医学开题报告（精选7篇）
课题支持选定包括选题的内容、重要性、必要性
有什么临床问题需要解决?医学科研设计从文献我们已经知道什么?课题选定来源于临床问题提出，没有问题就没有科研设计。例如足月儿、早产儿、低体重、极低体重;HIE、RDs、MAS;惊厥、黄疸、呼衰;常见病、罕见病;诊断、治疗、机理等。选题需要查阅文献，要了解有无文献，有多少文献，都是哪类文献包括书本、综述、病例、动物等，这些文献结果可靠性如何?其证据等级是高等级?
方法确定
如何确定研究对象、研究指标;如何测定、收集、组织、分析资料;与研究目的密切相关，是研究前己确定的计划的一部分。如何确定研究对象?研究人群包括入组原则、排除标准(时间、地点、人群);抽样方法有随机、非随机、具体方法又是什么?分组方法也包括随机、非随机、具体方法。干预方法包括干预的有无及方法。随访方法要描述有无随访及随访的方法。
结果表达
包括数据分析主要结果(与研究目的有关的)与一般资料：募集过程及结果、研究对象的一般特征;主要结果：研究分析结果，先画出表、图的框架，表强调变量具体值，图强调变化趋势、相互关系。至少2张表，一般资料中募集过程及结果、研究对象的一般特征;主要结果中研究分析的结果。
讨论路线
解释你的结果，判断你的解释，得出你的结论，评估你的结论。
开题报告是学位论文的一个总体规划和设计，是研究生学位论文工作的重要环节，是监督和保证学位论文质量的先决条件。它既是研究生进行科研课题研究的理论依据和前瞻性分析，也是对学生科研能力培养的一个有益的实践。对于临床医学专业学位研究生而言，在科研选题、研究方法等方面与一般的科研型研究生还是存在很大的不同，开题报告内容与临床资料和统计学方法关系十分密切，更加注重应用性。
1 选题的原则。
研究生学位论文的选题一般遵循以下原则：①在本学科范围内，涉及的内容是与本专业相一致的，避免在以后的论文答辩中出现问题。②创新性，开题报告选题内容一定要新颖，一般是前人没有做过的，或者是尚未得出明确结论有待深入探讨的问题。也可以是已经得出结论，但不同种族，不同地域之间存在差异，在医学上，很多流行病学资料显示，不同种族不同地域的人群的发病率、患病率以及治疗等存在很大的差异。此外创新性还表现在对待问题自己独特的见解，以及技术方法学上的创新。③可行性，课题题目应适中，结合本科室的科研实力量力而行。三年制医学专业学位研究生要承担大量的临床工作，基本上没有单独的科研实践，论文选题范围太大，实践操作起来难度较大，很难按时完成。因此在选题时不要“大题小做”应“小题大做”.④实用性，临床医学研究生最终还是要面对患者，选题时多选择应用性课题，因此更要注重课题的实用价值，切忌一味追求偏、难、怪，应着力于服务于医学、服务于患者。选题是研究工作实践的第一步，需要研究者积极思考，查阅大量的国内外相关文献，互相比较、多方论证的努力，从事学术研究的各种能力在其中都可以得到锻炼提高。
2 文献综述的撰写。
一般选题范围确定后，就进入收集资料阶段。研究生只有阅读大量的文献资料，才能充分了解国内外相关领域的新动态、新进展，新技术和新发现，从而确定自己课题研究的起点和切入点，并在他人研究的基础上有所创新医学硕士开题报告写作医学硕士开题报告写作。
文献综述不仅仅是相关领域学术研究的/堆砌0,而是在对文献进行阅读、选择、归纳整理和综合分析的基础上，对某一问题的研究状况提出自己的见解并进行综合叙述后写成的文章，属于二次文献范畴。医学硕士研究生阅读文献量应该在50篇以上，其中外文文献至少占50%,近三年的文献至少占70%,遇到非常有价值的外文文章，最好将其全文翻译出来，对于阅读以及专业英语水平的提高都会有很大的帮助。
书籍宜先看序言和目录，论著宜先看摘要和结果。医学文献综述一般分为四个内容：前言、主题、总结和参考文献。基本内容主要包括国内外研究现状、研究动态、研究方法，目前尚未解决的问题以及提出自己的意见等。整篇综述力求全面、准确、客观，尽量用自己的语言，避免大段引用原文，要在原文的基础上做出总结。文献综述的广度和深度，在很大程度上决定开题报告的质量，也是医学研究生科研实践的基本训练内容。
3 开题报告书内容。
首都医科大学医学硕士专业学位研究生开题报告书包括以下几方面内容：研究课题中英文摘要、课题立项依据、课题研究内容、课题研究的技术路线、课题前期研究基础或预实验结果及可行性分析、课题中关键问题及解决的措施、课题研究计划进度。
中英文摘要(约200字)应具有独立性，充分显示本文的创新之处，一般包括目的、方法、结果、结论四个部分，各部分冠以相应的标题。多采用第三人称撰写，尽量避免/本文0、/我们0等语医学硕士开题报告写作文章医学硕士。英文摘要尽量用被动语态，医学研究中难免会出现很多的专业术语，摘要中的缩略语、缩称，首次出现时要用全称;摘要的句子应力求简单，主谓语搭配得当，不要出现图表和引文。课题立题依据主要包括课题研究背景、目前国内外研究现状及分析、课题研究的目的及意义。课题研究背景也叫问题的提出，多从现实出发去论述，指出需要去研究去解决的问题。国内外研究现状及分析主要就是文献综述部分，课题研究的目的、意义是阐述为什么要研究，课题的学术和应用价值。
课题的研究内容，一般涉及研究对象、研究的问题、研究方法三个部分，相对于研究目的.而言，研究内容是研究课题所需解决的科学技术问题的具体化。医学科研的研究对象往往是动物、人或由人组成的群体，必须说明标本来源、样本数量及选择标准。医学研究问题的针对性强，常常还包含需要检测的相关指标，这些指标应与课题密切相关，具有较好的敏感性、特异性，使结果更为真实可信。医学课题的研究方法多种多样，目前应用较多的是流行病学方法，在选择统计学方法时，尤其要认真推敲，选择合适的统计学方法是提高课题结果说服力和可信度的关键环节，一个严谨规范的科学研究，必须以严谨规范的方法为支撑。
课题研究的技术路线就是整个研究的实验方法和具体步骤，多从基础问题开始，分阶段进行，比较分析时还会出现两条或多条路线同时进行，医学中多采用图表的方式表现，使之更加简明、清楚。先进可行的技术路线在很大的程度上决定着科研课题的价值，也关系到研究的时效及结果的准确性和可靠性。
课题前期研究基础或预实验结果及可行性分析，研究基础包括目前课题所处的研究阶段，准备工作的情况和目前已具备的条件(包括人员、仪器、设备等)，医学课题的研究周期相对较长，因此要得到理想的研究结果，预实验是必不可少的关键环节，通过对预实验结果的分析，能够对整个科研课题的远期目标做出较为准确的判断。课题的可行性分析也主要是综合上述两点对整个科研课题进行一个综合的评价，包括已取得的研究成果、研究人员的学术背景和研究经验、完成课题的技术支持、软硬件保障等。
课题中关键问题及解决的措施，这方面主要涉及在整个研究过程中出现的关键问题、重点、难点，并对这些问题作出科学的估计和判断，提出拟采用的解决方案和具体措施。课题研究的计划进度，包括本课题研究的时限，不同阶段(开始和结束时间都要有规定)的研究任务以及预期达到的结果，不同学期的研究日程安排等。最后还应要求研究生在开题答辩考核过程中对本课题做出经费预算。
4 开题报告的质量保证。
学位论文开题报告是研究生科研知识和能力的一个综合体现，是整个研究工作能否顺利进行，毕业论文答辩能否成功通过的重要保证，因此，必须对开题报告进行考核和评价医学硕士开题报告写作论文。
首都医科大学研究生部规定了医学硕士研究生开题报告书的统一格式，在开题考核前一周，研究生必须征得指导教师同意向学院研究生管理部门提出开题考核申请，并上交文献综述。研究生管理部门根据研究生所学专业和指导教师推荐，组建开题考核专家小组并组织开题。开题考核小组成员不少于3人，由本专业或相关专业的教授或副教授(或相当职称)的专家组成，其中教授(或相当职称)的专家不得少于2人，考核组长1名，导师不担任组长。开题考核程序分为：开题报告陈述、考核专家提问、考核专家评分三个环节
考核小组成员对研究生的开题报告书、文献综述、综合能力三方面进行总体考核和评价。学院安排答辩秘书1名，负责整个考核过程的记录，并对所有专家的评分进行汇总，最后由考核小组组长填写考核意见并签字。开题考核未通过者，半年内须重新开题，学院研究生管理部门负责整个考核过程的监督和审核工作。开题报告书和文献综述一式两份，分别由学校和学院研究生管理部门进行封存保管。
总之，要把开题报告纳入到整个研究生培养质量保障体系建设中去,增强研究生对所参加科研工作的责任心、主动性和创造性，从而提高整个研究生的科研能力和毕业论文质量。
分析化学是一门实践性非常强的专业，因此实验在其中占据着重要意义。
教学的开展离不开实验教学，在实验教学中学到更多实践知识，动手能力与实际操作能力也会随之获得提升。而随着科学技术的发展，大量的新型仪器以及检验技术相继出现，医学检验专业对学生动手能力的要求也会越来越高，学生只有同时兼具高实验操作技能、较高的理论水平、独立设计医学实验的能力以及较强的分析问题能力才能成为时代所需要的医学检验人才。由此，在医学检验专业的日常教学活动中，需要重视实验教学、利用实验教学来提升整体教学质量，让医学检验专业的学生在掌握牢固理论知识的同时可以同时获得实践机会，提升实践操作能力。此外，需要注意的是，在教学过程中，教师还需要纠正学生只重视医学部分内容而忽视化学部分内容的不正确思想，全面巩固基础知识，以免由于知识的漏洞而影响到实验教学的效果。
强化医学检验专业分析化学教学效果的措施
1、在教学内容方面，抓住重点，积极进行总结和归纳。
医学检验的学生在学习分析化学之前就已经学习过相关的医用基础化学课程，教师只需要将教学内容梳理一次学生就会明确自己薄弱以及所需要掌握的地方。然后教师可以针对性地对重点内容进行讲解，节省教学时间。分析化学所涉及的内容包括数学统计以及化学等，都属于比较复杂的内容，并且会出现比较多的公式。因此，教师在教学过程中需要善于归纳，将相似内容总结在一起，让学生可以更快记住重点内容。比如在计算弱酸性体系的分布系数时，涉及到的公式比较复杂，教师可以通过其中发掘规律的方式为学生找出便于记忆的方法：公式中的分母是按照氢离子浓度降幂的顺序排列的，分子则取决于型体中所含氢的个数。抓住这样的规律之后学生就可以更快并且更深刻地记住计算公式。
2、在教学模式方面，多种教学模式相结合，丰富课堂。
在教学模式方面，教师可以在确保教学质量的基础上加强与学生之间的互动。以讲授为主，同时结合谈论、提问、小论文以及习题课等辅助手段让学生的思考成为教学中心，激发学生的创造性思维，让学生感受到学习的乐趣并逐渐取得进步。首先，教师可以从溶液的移取、天平称量的操作方法等入手进行讲授教学，在与实验课结合的基础上培养学生对检测结果精度的重视。其次，在一部分知识结束之后教师可以利用提问教学的方式来强化学生对知识点的记忆，并让学生在抢答过程中获得成就感，激发出他们对分析化学的学习热情。再次，教师可以根据学生的知识掌握情况确定一个课题，让学生围绕该课题展开谈论并相互交流。学生在交流过程中不仅可以看到自己与同学之间的差距更可以明确认识到自己的不足，然后有针对性地进行强化训练。讨论教学的开展同时也可以提高学生在教学过程中的参与度，让学生成为教学主体，在活动过程中发挥主观能动性，更加积极、主动地学习。
论临床医学检验的现状及发展趋势
几十年来，我国的临床医学取得了稳健并且快速的发展，随之一起发展的循证医学也在临床医学中起到了广泛的应用。而临床检验学科已经从医学检验向检验医学发展，检验科不再是以往的辅助科室，其渐渐的在与临床相关联，已经成为一门独立的学科。医学检验是一门运用科学的现代物理化学知识和手段来进行医学诊断的学科，其主要研究如何运用科学的实验技术和先进的设备为临床诊断和治疗提供依据。医学检验涉及了基础医学、生物化学、临床医学、管理学等诸多的科目，运用这些学科可以快速的准确的为疾病提供诊断的确实依据，是现代医疗工作中所不可缺少的一个环节。
我国检验医学的发展现状
近年来，我国的临床医学检验教育得到了飞速的发展，20世纪50年代初期，我国便在中专卫生学校开设了医学检验的专业，借此培养初级、中级医学检验相关人才。1983年有相继在高等医学院校设置了本科医学检验的专业，并为我国培养出大批的医学检验相关高等人才。直至今日，我国的医学检验相关人才的培养体系已经初步完成，形成了一套专业的人才培养渠道。现已经形成了目标明确，具有普通检验本专科、硕士和博士研究生(医学科学学位)、本硕连读七年制(医学专业学位)、成人检验本专科、高职检验本专科等层次齐全、形式多样的教育体系。这种完善的人才培养体系，为我国临床检验医疗事业培养出了大批的优秀人才，并使得临床检验人员的基本素质得到了普片的提高。
我国的质量控制管理体系起步较晚，但部分学科以及形成了较为合理的质控体系。目前，分析前质控、分析中质控和分析后质控都取得了一定程度的良好发展，其已经可以基本的保证结果的准确性和可比性。同时随着改革开放深化和经济增长，我国也在大力的运用国际信息技术交流，学习和引进医疗发达国家的先进专业技术和检验设备。
我国临床医学检验中存在的主要问题
资源管理的不合理：目前，许多医院的资源管理工作做得不好，其具体体现在：人员编配不合理(存在部分岗位人员配置过多或过少的情况)和医疗设备的编配不合理。人员编配不合理导致了检验队伍的松散，相互之间不能形成有力的合作，检验过程存在着误操作和不合理，导致了检验结果的误差。而且这种人力资源编配不合理现象还会带来一些问题，例如同一医院内重复配置人员设备会造成资源的浪费;由于人员配置的分散，还会使得整个体系得不到统一的管理，使得医院相关人员的业务素质得不到提高。
检验医学理论体系不全：虽说近年来我国的临床医学方面取得了很大的发展，但是我国的医学检验领域在发展上主要集中于硬件的建设上，更加倾向于设备的更新换代，反而忽视了对于检验医学理论的重视程度。目前，我国的医学检验只能算是实验医学检验学其还未形成一套完善的、新的`理论体系。针对医学检验问题上的科研能力较低，相关人员的创新(科研)意识淡薄，这种现象已经阻碍了检验医学的良好发展趋势。
质量控制不到位：没有良好的质量控制不仅会影响检验结果的准确性，而且其还可能误导临床诊断和治疗，给患者的健康产生影响，严重的甚至会危及到患者的生命。质量控制工作在任何情况下都必须重视，但部分检验人员因为现代化设备的发展和应用，开始逐渐的淡薄对将质控工作的重视。
临床医学检验未来的发展趋势
提高人才素质：我国的检验医学正向着信息化、自动化发展。所以我们应该根据社会和检验医学发展的需要，来培养适应新时代的高素质检验人才。首先，临床医学检验的检验人员必须具备扎实的专业基础，其中包括临床医学基础知识，物理化学等相关的知识。其次，临床检验人员必须具备专业的设备操作技能，设备操作的规范可以影响到检验结果的准确。最后在教育上还应当进行引导，努力扩宽临床检验人员的相关知识。不能仅仅局限于本专业的知识，还应当对其它相关的知识进行了解。
一、开题报告的写法
开题报告的基本内容及其顺序：
论文的目的与意义；国内外研究概况；论文拟研究解决的主要问题；论文拟撰写的主要内容（提纲）；论文计划进度；其它。其中的核心内容是“论文拟研究解决的主要问题”。在撰写时可以先写这一部分，以此为基础撰写其他部分。具体要求如下：
1.论文拟研究解决的问题
明确提出论文所要解决的具体学术问题，也就是论文拟定的创新点。
明确指出国内外文献就这一问题已经提出的观点、结论、解决方法、阶段性成果。 评述上述文献研究成果的不足。 医`学教育网搜集整理提出你的论文准备论证的观点或解决方法，简述初步理由。
你的观点或方法正是需要通过论文研究撰写所要论证的核心内容，提出和论证它是论文的目的和任务，因而并不是定论，研究中可能推翻，也可能得不出结果。开题报告的目的就是要请专家帮助判断你所提出的问题是否值得研究，你准备论证的观点方法是否能够研究出来。
一般提出3或4个问题，可以是一个大问题下的几个子问题，也可以是几个并行的相关问题。
2.国内外研究现状
只简单评述与论文拟研究解决的问题密切相关的前沿文献，其他相关文献评述则在文献综述中评述。基于“论文拟研究解决的问题”提出，允许有部分内容重复。
3.论文研究的目的与意义
简介论文所研究问题的基本概念和背景。
简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题。
简单阐述如果解决上述问题在学术上的推进或作用。
基于“论文拟研究解决的问题”提出，允许有所重复。
4.论文研究主要内容
初步提出整个论文的写作大纲或内容结构。由此更能理解“论文拟研究解决的问题”不同于论文主要内容，而是论文的目的与核心。
二、开题报告的格式
由于开题报告是用文字体现的论文总构想，因而篇幅不必过大，但要把计划研究的课题、如何研究、理论适用等主要问题说清楚，应包含两个部分：总述、提纲。
1.总述
开题报告的总述部分应首先提出选题，并简明扼要地说明该选题的目的、目前相关课题研究情况、理论适用、研究方法、必要的数据等等。
2.提纲
开题报告包含的论文提纲可以是粗线条的，是一个研究构想的基本框架。可采用整句式或整段式提纲形式。在开题阶段，提纲的目的是让人清楚论文的基本框架，没有必要像论文目录那样详细。
3.参考文献
开题报告中应包括相关参考文献的目录
4.要求
开题报告应有封面页，总页数应不少于4页。版面格式应符合以下规定。
开题报告
学生：
一、选题意义
1、理论意义
2、现实意义
二、论文综述
理论的渊源及演进过程
题目：中印传统医学现代发展对比研究
一、研究背景
中、印两国政府均承认并保护传统医学的发展，并且越来越重视发挥传统医学在国家卫生保健体系中的作用。印度传统医学历史、发展现状、国内外发展战略等都与中国传统医学存在极大可比性，是中国传统医学国际化发展强大的竞争对手。然而长期以来，我国对印度传统医学的情况了解并不多，尤其缺乏对中印两国传统医学现代发展的对比研宄。因此，有必要对印度传统医学管理、政策法规、医疗资源与服务、教育与科研、传统医药产业及国际化发展等现状进行研宄，为中国传统医学本土发展及国际化发展提供借鉴与参考。并阐释对我国传统医药产业国际化发展的启示。
二、研究目的与意义
1.本研究目的是通过对中印两国传统医学的国家政策、管理、医疗资源与服务、教育、科研、产业等各方面的现代本土发展及传统医药产业国际化发展现状进行对比分析，寻找当前我国传统医药本土发展及传统医药产业国际化发展过程中存在的问题与不足，阐释对我国传统医学本土发展及传统医药产业国际化发展的启示。
2.本研究一方面可为我国传统医药本土发展及国际化发展提供借鉴，另一方面可以互通有无，促进中印两国传统医学交流与发展，并促进世界传统医学的健康发展。
三、研究内容
1.对比分析中印两国传统医学现代发展现状与差异，主要包括：国家传统医学发展方针政策、传统医学管理、传统医学医疗资源与服务、传统医学科研、传统医学教育、传统医学产业及国际贸易等方面内容；
2.对比分析中印两国促进传统医学发展的因应策略、具体政策措施及取得的成效，寻找我国传统医学本土发展及传统医药产业国际化发展过程中存在的问题与不足；
3.在对比分析的基础上，针对传统医学本土发展及传统医药产业国际化发展过程中存在的问题与不足，阐释对我国传统医学本土发展及传统医药产业国际化发展的启示。
四、提纲
目录
摘要
Abstract
前言
正文
1.研究目的、意义与背景
1.1研究目的与意义
1.2研究背景
2.研究内容、方法与技术路线
2.1研究内容
2.2研究方法
2.3技术路线
3.中印传统医学政策法规与管理对比
3.1印度
3.1.1印度传统医学管理机构
3.1.2印度传统医学立法
3.1.2印度传统医学国家政策
3.2中国
3.2.1中国传统医学管理机构
3.2.2中国传统医学立法
3.2.3中国传统医学国家政策
4.中印传统医学医疗资源与服务对比
4.1传统医学医疗资源
4.1.1印度
4.1.2中国
4.2中印两国政府促进传统医学资源与服务发展的政策措施
4.2.1印度
4.2.2中国
5.中印两国传统医学高等教育对比
5.1传统医学高等教育资源
5.1.1印度传统医学高等教育院校数与招生数
5.1.2中国传统医学高等教育院校数与招生数
5.2印度阿育吠陀院校与中国高等中医药院校平均招生数
5.3中印两国传统医学高等教育院校主办机构
5.4中印两国传统医学高等教育“师生比”与“生床比”
6.中印两国促进传统医学教育发展的政策措施
6.1印度
6.2中国
7.中印两国传统医学科研对比
7.1印度研究机构
7.1.1科研管理及经费来源
7.1.2阿育吠陀研究的优先领域
7.2中国
7.2.1中医药及民族医药科研机构
7.2.2中医药科技科研经费来源
7.2.3中医药研究领域与科研成果
创新点
结语
参考文献
致谢
五、研究方法
1.文献分析法
广泛收集中印两国传统医学现代发展相关资料，通过国内、外传统医学相关期刊文献数据库、书籍、网络资源等获取中印两国传统医学相关文献以及传统医学政策、法律、法规等相关文本，通过对相关文献及文本的系统查阅、分析、整理，分析中印两国传统医学发展现状与差异。
2.统计分析法
本研究收集了中印两国关于传统医学医疗资源与服务、传统医学教育、以及传统医学产业、贸易等官方统计数据，针对不同统计指标，进行了增长幅度、年均增长率、所占比例等计算，通过量化分析测度中印两国传统医学发展水平及存在的差异。
3.比较推理法本研宄比较分析了中印两国政府对传统医学的管理模式及促进传统医学发展的政策措施及执行效果，从中分析两国的成功实践及对对方的借鉴与启示，并重点阐释对我国传统医学本土发展的启示。
4.竞争情报学方法本研宄用竞争情报学“竞争对手分析”及“分析”法，对中印两国传统医学产业的国际化发展进行分析，并阐释对我国传统医药产业国际化发展的启示。
六、研究进度安排
20xx-5-20~20xx-5-16:检查修改完成一次论文初稿
20xx-5-17~20xx-5-29:根据指导老师的讲评及意见，修改并提交二次论文草稿
20xx-5-30~20xx-5-31:讲评第二次论文草稿、集中解决有关论文漏洞问题并及时修改
20xx-6-01~20xx-6-11:基本完成论文大纲要求，论文成型，指导老师讲评修改并定稿
20xx-6-12~20xx-6-18:整理打印论文、装订论文
20xx-6-19~20xx-6-30:准备参加答辩
一、立题依据（科学意义及国内外现状分析及参考文献）
恶性黑色素瘤是一种高度恶性且侵袭性的癌之一，多发生于皮肤，早期发生血行转移。对放、化疗不敏感，在世界范围内发病率增高，人们一直在期待着可以征服恶性黑素瘤的新的疗法的出现！
最近大量的数据表明恶性肿瘤的发展与T—钙粘蛋白的表达变化相关、T—钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1—3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4—9]等多种恶性肿瘤中被检测到表达减少、最近的研究表明T/H—钙粘蛋白在乳腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长，降低体外培养的肿瘤细胞的侵袭潜能[1]、T/H—钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白分子在人类许多癌细胞中表达都降低表明它或许在肿瘤细胞的侵袭和转移[10]及维持正常细胞的表型中起重要作用[11]、T/H—钙粘蛋白与肿瘤的发生、发展有着密切的联系，也许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机、T—钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用，目前还没有相关研究的报道，所以本实验将进行相关方面的探讨性研究！
二、研究内容及预期成果（说明具体研究内容、创新点及拟解决的关键问题、预期成果及提供形式）
研究内容：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T—cadherin表达情况
第二部分T—cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
第三部分：T—cadherin基因的真核表达及生物活性分析
创新点：首次将T—cadherin基因转染黑素瘤细胞
拟解决的关键问题：通过RT—PCR反应扩增出T—cadherin的基因全长。
预期成果及提供形式：
观察T—钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素瘤细胞中的表达情况！
进一步阐明T—钙粘蛋白作用机制
T—钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖和转移活性的抑制情况，探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其它肿瘤的方法！
三、研究方案（包括研究方法、技术路线、研究进度安排）
研究方法：
第一部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T—cadherin表达情况
免疫组织化学和免疫细胞化学
1、材料：从正常人皮肤切取的痣组织，人黑色素瘤细胞株
2、主要试剂和溶液
（1）第一抗体：兔抗人T—cadherin抗体
（2）第二抗体：生物素标记羊抗兔IgG
（3）“三抗”：链亲和霉素标记HRP
3、设备
4、方法
（1）冷冻切片的免疫染色程序
（2）活细胞的免疫染色程序
5、荧光显微镜检
注意：为保证结果的可靠性应该同时设有对照
阳性对照（正常组织）；
阴性对照（PBS代替一抗）以证明抗体的特异性。
第二部分T—cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
1、材料：
（1）组织和细胞
（2）菌株与质粒
（3）工具酶
（4）试剂
（5）仪器
2、方法
（1）引物的设计
（2）总RNA的提取：异硫氰酸胍—酚—氯仿抽提一步法
（3）甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量，观察所提RNA有无明显降解；
（4）逆转录RT反应：为了证实RT反应的成功设管家基因GAPDH为内对照
（5）PCR扩增：利用上下游引物，在DNA聚合酶下对目的片段进行扩增，PCR过程设β—actin为内对照
（6）PCR产物的回收、纯化
（7）PCR产物的克隆
（8）DNA序列测定
（9）真核重组表达质粒的构建
（10）阳性重组质粒的鉴定和筛选
（11）质粒的大量提取
（12）转染黑色素瘤细胞
第三部分：T—钙粘蛋白基因的真核表达及生物活性分析
1、材料
2、方法
（1）转染细胞的培养
（2）Western印迹法检测转染后蛋白的表达
（3）流式细胞周期分析
（4）凋亡的检测
技术路线图：
研究进度安排：
20xx、9——20xx、7学习学位课程，查阅文献，完成课题设计
20xx、9——20xx、9基本完成实验研究工作
20xx、10——20xx、3完成实验补遗工作并进行统计分析，撰写论文
20xx、4——20xx、6论文答辩
四、经费预算
试剂费用：15000元
组织及细胞：1000元
文献资料费：500元
论文打印费：1000元
答辩费：1500元
总计：19000元
五、课题可行性分析
实验在导师的指导下进行，导师段昕所教授、主任医师对黑色素瘤的诊断治疗、检测方法和研究进展有深入的了解，对本课题的研究设计及实验有重要的指导意义。
已完成黑色素瘤及T—钙粘蛋白研究最新进展的文献检索和综述报告工作。
所有实验均在承德医学院附属医院皮肤病研究室和中心实验室完成。实验室的老师实验技术熟练，在细胞培养、免疫组化及分子生物学等方面都可给予指导；实验所需的科研仪器设备实验室均具备。
参考文献：
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